Unitat d'Immunologia

1. Caracterització molecular i funcional de receptors inhibidors en leucòcits


Investigador principal
Miguel López-Botet

Grup de treball
Dr. Joan Sayós Ortega
Dr. Carles Morte Martí
Sra. Helena Aguilar Calafell
Sra. Damiana Álvarez Errico
Sra. Raquel Flores Peirats

Finançament
Plan Nacional I+D (Ministeri de Ciència i Tecnologia)
Fons d'Investigacions Sanitàries
Fundació La Marató de TV3

Col·laboradors externs
Dr. Pedro Aparicio

Resum
S'han identificat diferents receptors de superfície que exerceixen una funció inhibidora en diferents tipus de leucòcits; alguns s'adscriuen a la superfamília de les immunoglobulines (Ig-SF), mentre que altres són molècules del tipus lectina. Un grup d'aquests receptors ha estat estudiat en cèl·lules NK i limfòcits T. El mecanisme d'inhibició implica l'associació de la tija citoplasmàtica del receptor a fosfatases amb dominis SH2 (SHP1 o SHIP). Alguns d'aquests receptors interaccionen amb molècules conegudes (MHC de classe I, Fc de la IgG, àcid siàlic), tot i que encara es desconeix la naturalesa dels lligands en molts casos. L'anàlisi detallada de l'estructura, polimorfisme, distribució i funció de cada un d'aquests sistemes receptor-lligand està mostrant noves facetes de la regulació de la resposta immunitària davant de patògens microbians, tumors i empelts; d'una altra banda, aquest coneixement pot aportar claus per a la comprensió de la fisiopatologia de processos inflamatoris crònics de base autoimmune.


Assoliments científics i publicacions
Les contribucions principals de l'equip, anteriorment localitzat a l'Hospital de la Princesa (Madrid) fins al juliol del 2000, han estat la caracterització (a): dels receptors tipus lectina de cèl·lules NK (CD94/NKG2) específics per a HLA-E, i (b): d'un receptor inhibidor per a molècules HLA, expressat per diferents llinatges de leucòcits (ILT2). S'han produït diferents anticossos monoclonals que han estat àmpliament distribuïts a altres laboratoris i, eventualment, comercialitzats. Entre els articles (originals i revisions) publicats en els últims cinc anys es consideren d'especial rellevància els següents


CARRETERO, M.; CANTONI, C.; BELLÓN, T.; BOTTINO, C.; BIASSONI, R.; RODRÍGUEZ, A.; PÉREZ-VILLAR, J. J.; MORETTA, A.; MORETTA, L.; LÓPEZ-BOTET, M. "The CD97 and NKG2-A C-type Lectins Covalently Assemble to Form an Inhibitory Receptor for HLA Class I Molecules". European Journal of Immunology, 27. 1997. Pàg. 563.

COLONNA, M.; NAVARRO, F.; BELLÓN, T.; LLANO, M.; GARCÍA, P.; SAMARIDIS, J.; ANGMAN, L.; CELLA, M.; LÓPEZ-BOTET, M. "A Common Inhibitory Receptor for Major Histocompatibility Complex Class I Molecules on Human Lymphoid and Myelomonocytic Cells". Journal of Experimental Medicine, 186. 1997. Pàg. 1809.

CARRETERO, M.; PALMIERI, G.; LLANO, M.; TULLIO, V.; SANTONI, A.; GERAGHTY, D. E.; LÓPEZ-BOTET, M. "Specific Engagement of the CD94/NKG2A Killer Inhibitory Receptor by the HLA-E Class Ib Molecule Induces SHP-1 Phosphatase Recruitment to Tyrosine-phosphorylated NKG2A: Evidence for Receptor Function in Heterologous Transfectants". European Journal of Immunology, 28. 1998. Pàg. 1280.

LEE, N.; LLANO, M; CARRETERO, M.; ISHITANI, A.; NAVARRO, F.; LÓPEZ-BOTET, M.; GERAGHTY, D. E. "HLA-E is a Major Ligand for the Natural Killer Inhibitory Receptor CD94/NKG2A". Proceedings of the National Academy of Sciences U.S.A., 95. 1998. Pàg. 5199.

LLANO, M.; LEE, N.; NAVARRO, F.; GARCÍA, P.; ALBAR, J. P.; GERAGHTY, D. E.; LÓPEZ-BOTET, M. "HLA-E-bound Peptides Influence Recognition by Inhibitory and Triggering CD94/NKG2 Receptors: Preferential Response to an HLA-G-derived Nonamer". European Journal of Immunology, 28. 1998. Pàg. 2854.

NAVARRO, F.; LLANO, M.; BELLÓN, T.; COLONNA, M.; GERAGHTY, D. E.; LÓPEZ-BOTET, M. "The ILT2 (LIR-1) and CD94/NKG2A NK Cell Receptors Respectively Recognize HLA-G1 and HLA-E Molecules Co-expressed on Target Cells". European Journal of Immunology, 29. 1999. Pàg. 277.

COLONNA, M.; NAVARRO, F.; LÓPEZ-BOTET, M. "A Novel Family of Inhibitory Receptors for HLA Class I Molecules that Modulate Function of Lymphoid and Myeloid Cells". Current Topics in Microbiology and Immunology, 244. 1999. Pàg. 115.

LÓPEZ-BOTET, M.; BELLÓN, T. "NK Cell Activation and Inhibition by Receptors for MHC Class I". Current Opinion in Immunology, 11. 1999. Pàg. 301.

VALÉS-GÓMEZ, M.; REYBURN, H. T.; ERSKINE, R. A.; LÓPEZ-BOTET, M.; STROMINGER, J. L. "Kinetics and Peptide Dependecy of the Binding of the Inhibitory NK Receptor CD94/NKG2-A and the Activating Receptor CD94/NKG2-C to HLA-E". EMBO Journal, 18. 1999. Pàg. 4250.

CARRETERO, M.; LLANO, M.; NAVARO, F.; BELLÓN, T.; LÓPEZ-BOTET, M. "Mitogen-activated Protein Kinase Activity is Involved in Effector Functions Triggered by the CD94/NKG2-C NK Receptor Specific for HLA-E". European Journal of Immunology, 30. 2000. Pàg. 2842.




2. Regulació transcripcional de l'expressió de citoquines en limfòcits. Paper de la calcineurina i factors de la transcripció de la família NFAT


Investigador principal
Jose Aramburu Beltrán

Equip de treball
Sra. Josefina Martínez Hoyos
Sra. Raquel Flores Peirats

Finançament
Fundació La Caixa
Fundació La Marató de TV3

Col·laboradors externs
Dr. Anjana Rao. Harvard Medical School, Boston (EUA).


La família de factors de transcripció NFAT (Nuclear Factor of Activated T cells) comprèn cinc proteïnes, amb l'elevada homologia en el seu domini d'unió a DNA i especificitat d'unió a DNA. Quatre dels membres (NFATC1, 2, 3, 4) són activats per la fosfatasa calcineurina en resposta a senyals de calç, mentre que NFAT5 respon a l'estrès osmòtic. Els NFATC regulen l'expressió de les citoquines i els gens implicats en la diferenciació Th1/Th2 i en l'activació limfocitària. NFAT5 és induït i activat en resposta a l'estrès osmòtic, regulant l'expressió de gens osmoprotectors. Les cèl·lules T expressen un mínim de quatre proteïnes NFAT, NFATC1, 2 i 4, i NFAT5. Aquesta redundància aparent està sent investigada. L'estudi dels NFAT té interès terapèutic en immunosupressió i enfermetats autoimmunes, ja que dos immunosupressors emprats en la clínica, la ciclosporina A i la FK506, actuen bloquejant la calcineurina i, per tant, l'activitat NFAT. No obstant això, aquests fàrmacs produeixen greus efectes secundaris a causa, en part, a l'augment de la secreció generalitzada de TGFb 1 en diversos teixits. Actualment es desconeix si l'expressió de TGFb està regulada per proteïnes NFAT o bé, per quin mecanisme la ciclosporina augmenta la seva expressió. En el nostre laboratori estem estudiant la regulació transcripcional del TGFb 1 i la implicació dels NFATC i NFAT5 en la regulació de diferents citoquines en limfòcits, amb l'objectiu de determinar si la inhibició selectiva dels NFAT podria donar lloc a tractaments terapèutics més específics que els emprats actualment



Publicacions

KIANI, A.; RAO, A.; ARAMBURU, J. "Manipulating Immune Responses with Immunosuppressive Agents that Target NFAT". Immunity, 12. 2000. Pàg. 359-372.

OKAMURA, H.; ARAMBURU, J.; GARCÍA-RODRÍGUEZ, C.; VIOLA, J. P.; RAGHAVAN, A.; THAILIANI, M.; ZHANG, X.; QIN, J.; HOGAN, P. G.; RAO, A. "Concerted Dephosphorylation of the Transcription Factor NFAT1 Induces a Conformational Switch that Regulates Transcriptional Activity". Molecular Cell, 6. 2000. Pàg. 539-550.

ARAMBURU, J.; YAFFE, M. B.; CANTLEY, L. C.; HOGAN, P. G.; RAO, A. "Affinity-driven Peptide Selection of an NFAT Inhibitor More Selective than Cyclosporin A. Science, 285. 1999. Pàg. 2129-2133.

LÓPEZ-RODRÍGUEZ, C.; ARAMBURU, J.; RAKEMAN, A. S.; RAO, A. "NFAT5, a Constitutively Nuclear NFAT Protein that Does Not Cooperate with Fos and Jun". Proceedings of the National Academy of Sciences, USA, 96. 1998. Pàg. 7214-7219.

ARAMBURU, J.; GARCÍA-CÓZAR, F.; RAGHAVAN, A.; OKAMURA, H.; RAO, A.; HOGAN, P. G. "Selective Inhibition of NFAT Activation by a Peptide Spanning the Calcineurin Targetting Site of NFAT". Molecular Cell, 1. 1998. Pàg. 627-637.